Amidase (AMD)
Enzyme:Là chất xúc tác sinh học cao phân tử, hầu hết các enzym là protein
Amidase:Xúc tác quá trình thủy phân các amit béo và thơm nội sinh và ngoại lai khác nhau bằng cách chuyển một nhóm acyl vào nước với việc tạo ra các axit tự do và amoniac.Axit hydroxamic và các axit hữu cơ khác được sử dụng rộng rãi làm thuốc vì chúng là thành phần của các yếu tố tăng trưởng, kháng sinh và chất ức chế khối u.Các amidase có thể được chia thành các acylase loại R và loại S tùy theo độ chọn lọc lập thể của chất xúc tác.
Ngoài việc xúc tác quá trình thủy phân các amit, amidase cũng có thể xúc tác cho các phản ứng chuyển acyl khi có mặt các đồng cơ chất như hydroxylamine.
Amidase với các nguồn khác nhau có tính đặc hiệu cơ chất khác nhau, một số chỉ có thể thủy phân các amit thơm, một số chỉ có thể thủy phân các amit béo, một số lại thủy phân các amit α-hoặc ω-amino.Hầu hết các amin chỉ có hoạt tính xúc tác tốt đối với các amin mạch hở hoặc thơm đơn giản, còn đối với các nhân thơm phức tạp, các amin dị vòng, đặc biệt là các amin có nhóm thế ortho, hoạt tính thường thấp (chỉ một số enzym thể hiện tác dụng xúc tác tốt hơn).
Cơ chế xúc tác:
| Enzyme | Mã sản phẩm | Mã sản phẩm |
| Bột Enzyme | ES-AMD-101 ~ ES-AMD-119 | một bộ 19 amidase, 50 mg mỗi 19 món * 50mg / món, hoặc số lượng khác |
| Bộ công cụ sàng lọc (SynKit) | ES-AMD-1900 | một bộ 19 amidase, 1 mg mỗi 19 món * 1mg / món |
★ Độ đặc hiệu của chất nền cao.
★ Tính chọn lọc chiral mạnh mẽ.
★ Hiệu quả chuyển đổi cao.
★ Sản phẩm phụ ít hơn.
★ Điều kiện phản ứng nhẹ.
★ Thân thiện với môi trường.
➢ Nên tiến hành sàng lọc enzyme đối với các cơ chất cụ thể vì tính đặc trưng của cơ chất, và nhận được một loại enzyme xúc tác cho cơ chất đích có hiệu quả xúc tác tốt nhất.
➢ Không bao giờ tiếp xúc với các điều kiện khắc nghiệt như: nhiệt độ cao, pH cao / thấp và dung môi hữu cơ có nồng độ cao.
➢ Thông thường, hệ phản ứng nên bao gồm cơ chất, dung dịch đệm (pH phản ứng tối ưu của enzym).Đồng cơ chất như hydroxylamine nên có mặt trong hệ thống phản ứng chuyển acyl.
➢ AMD nên được bổ sung sau cùng vào hệ thống phản ứng với độ pH và nhiệt độ phản ứng tối ưu.
➢ Tất cả các loại AMD đều có các điều kiện phản ứng tối ưu khác nhau, vì vậy mỗi loại AMD cần được nghiên cứu thêm từng loại.
ví dụ 1(1):
Hoạt động thủy phân thành các chất nền Amide khác nhau
| Cơ chất | Hoạt động cụ thể μmols phút-1mg-1 | Cơ chất | Hoạt động cụ thể μmols phút-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1,4 |
| Propionamide | 3,9 | p-OH benzamide | 1,2 |
| Lactamide | 12,8 | ο-NH2benzamide | 1,0 |
| Butyramide | 11,9 | p-NH2benzamide | 0,8 |
| Isobutyramide | 26,2 | ο-Toluamide | 0,3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Hexanamide | 6.4 | Nicotinamide | 1,7 |
| Cyclohexanamide | 19,5 | Isonicotinamide | 1,8 |
| Acrylamide | 10,2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metacrylamide | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3,4 | Indol-3-axetamit | 1,9 |
| Benzamide | 6,8 |
Phản ứng được thực hiện trong dung dịch đệm natri phosphat 50mM, pH 7,5, ở 70 ℃.
| Amides | Hydroxylamine | Hydrazine |
| Acetamide | 8,4 | 1,4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22,7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Phản ứng được thực hiện trong dung dịch đệm natri phosphat 50mM, pH 7,5, ở 70 ℃.
Nồng độ thuốc thử liên quan: amit, 100 mM (benzamit, 10 mM);hydroxylamine và hydrazine, 400 mM;enzym 0,9 μM.
Ví dụ 2(2):
Ví dụ 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., và cộng sự.Những người cực đoan, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Hóa sinh quy trình, 2015, 50 (8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Hóa học tổ chức sinh học, 2017, Trực tuyến 7.
